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Le mode défis est un mode de jeu de New Super Mario Bros. U. Il s'agit d'un ensemble de défis catégorisés selon leur difficulté représentée par une à cinq étoiles. Alors que certains prennent place dans un niveau du jeu principal, d'autres prennent place dans des lieux inédits. Le joueur reçoit une médaille de bronze, d'argent ou d'or selon la façon dont il termine un défi.